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    (農業(yè)部1025號公告-2-2008) 畜禽肉中甲硝唑、地美硝唑殘留量檢測 LC-MS/MS 法
    發(fā)布日期:2019-03-29

    硝基咪唑類(lèi) (Nitroimidazoles) 藥物是帶有硝基的咪唑化合物,其性狀為白色或淡黃色結晶,弱堿性,能和酸結合成鹽,遇光易分解,易溶于甲醇,微溶于水,主要用于預防和治療家禽的滴蟲(chóng)病、豬的出血性下痢及厭氧菌感染,并具有促生長(cháng)作用,但是該類(lèi)藥物對哺乳動(dòng)物具有致

    癌、致畸、致突變作用和遺傳毒性。因此歐盟、北美和我國等都禁止了硝基咪唑在食品動(dòng)物中的使用。農業(yè)部1025號公告-2-2008規定了在畜禽肉中硝基咪唑類(lèi)藥物殘留方法檢出限為1μg/kg。

    (1) 樣品提取

    稱(chēng)取2.00g(精確到0.01g)均質(zhì)好的樣品,置于50.0mL離心管中,加入15.0mL 乙酸乙酯,渦旋振蕩2min,4000rpm離心5min,上清液轉移至80mL頂空瓶中,殘渣用15.0mL乙酸乙酯重復提取一次,合并兩次提取液,加入4g氯化鈉和20.0mL正己烷,振蕩器上振蕩10min,4200rpm離心10min,小心吸取下層乙酸乙酯層于另一離心管中,氮氣吹至近干, 用6mL 0.1mol/L鹽酸溶液溶解殘渣備用。

    (2) 凈化方法

    先將Cleanert PCX (60mg/3mL)小柱分別用2.0mL甲醇、2.0mL 0.1mol/L鹽酸水溶液活化平衡,然后樣品殘液過(guò)柱(流速控制在2~3 mL/min),棄去濾液;再用1.0mL 0.1mol/L鹽酸水溶液、1.0mL甲醇和1.0mL甲醇-水(1:9,v/v)淋洗SPE柱,棄去淋洗液,最后用3.0mL甲醇-5%氨水(3:2,v/v)洗脫于錐形試管中,40℃氮氣吹干。用1 mL甲醇-水溶液(1:9,v/v)溶解殘留物,過(guò)0.22μm尼龍針式過(guò)濾器后待測。

    (3) 檢測方法

    3.1 色譜條件

    色譜柱:Venusil ASB C18,2.1×100mm,5μm,150?;

    流動(dòng)相:A相-水,B相-乙腈

    柱 溫:35℃;

    進(jìn)樣量:5μL;

    表1 液相色譜梯度洗脫條件:

    時(shí)間(min)

    流速 (mL/min)

    A/%

    B/%

    0

    0.35

    100

    0

    1.5

    0.35

    100

    0

    3.5

    0.35

    60

    40

    4

    0.35

    60

    40

    4.01

    0.35

    5

    95

    5

    0.35

    5

    95

    5.01

    0.35

    100

    0

    7

    0.35

    100

    0

    3.2 質(zhì)譜條件

    離子源:電噴霧離子源               掃描方式:正離子掃描

    電噴霧電壓:5500 V                 霧化氣壓力:55 psi

    氣簾氣壓力:13 psi                 輔助氣壓力:60 psi

    離子源溫度:600℃                  采集方式:多反應監測(MRM)

    Q1、Q3均為單位分辨率

    質(zhì)譜參數(見(jiàn)表2)

    (農業(yè)部1025號公告-2-2008) 畜禽肉中甲硝唑、地美硝唑殘留量檢測 LC-MS/MS 法

    (4) 實(shí)驗結果

    由表3可知,采用固相萃取結合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測甲硝唑和地美硝唑,加標量為1.0μg/kg加標回收率為90%~100%,能夠滿(mǎn)足檢測要求。由圖1可看出經(jīng)Cleanert PCX固相萃取柱凈化,采用Venusil ASB C18色譜柱檢測能夠使甲硝唑和地美硝唑得到良好的分離,且兩種物質(zhì)峰形良好,保留時(shí)間穩定。

    表3 硝基咪唑類(lèi)藥物加標回收實(shí)驗結果(n=3):

    (農業(yè)部1025號公告-2-2008) 畜禽肉中甲硝唑、地美硝唑殘留量檢測 LC-MS/MS 法

    圖1 硝基咪唑類(lèi)樣品加標1.0μg/kg液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜質(zhì)量色譜圖

    結論:

    本實(shí)驗建立了硝基咪唑類(lèi)殘留量檢測的LC-MS/MS檢測方法,并結合固相萃取技術(shù)對禽畜類(lèi)肉中硝基咪唑類(lèi)藥物的殘留量進(jìn)行了測定。對于加標量為1μg/kg的樣品進(jìn)行了檢測,回收率在90%~100%,符合國標要求,固相萃取方法穩定并且色譜柱重現性良好,說(shuō)明本方法能夠用于檢測動(dòng)物源性食品中的硝基咪唑殘留量。

    (5) 訂貨信息:

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    規格包裝

    訂貨號

    Venusil ASB   C18

    5μm,150?,2.1×100mm

    VS951002-0

    Cleanert® PCX

    60mg/3mL,50/pk

    CX0603

    保護柱套

    適用于4.6×10mm和2.1×10mm

    SH-100

    直聯(lián)式保護柱芯

    5μm,150?,2.1×10mm

    VS950102-0S

    1.5 mL樣品瓶

    短螺紋透明帶書(shū)寫(xiě)32×11.6mm,100/pk

    1109-0519

    1.5mL樣品瓶蓋

    9   mm中心孔藍蓋,紅色橡膠/米色PTFE隔墊,45.Shore A 1.0 mm,100/pk

    0915-1819

    針式過(guò)濾器(Nylon)

    13mm,0.22μm,200/pk

    AS021320

    一次性注射器

    2mL兩件式 無(wú)針頭,100/pk

    LZSQ-2ML

    乙腈UV級

    4L/瓶,色譜純

    015-4

    甲醇

    4L/瓶,色譜純

    S230-4

    應用編號:AF10027

    在線(xiàn)客服
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