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    油脂檢測/application當前位置: 首頁(yè) ? 行業(yè)應用 ? 食品安全 ? 油脂檢測 ? 正文
    (GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法
    發(fā)布日期:2019-03-29

    前言

    食品抗氧化劑是能阻止或延緩食品氧化變質(zhì)、提高食品穩定性和延長(cháng)貯存期的食品添加劑。氧化反應不僅會(huì )使食品中的油脂變質(zhì),而且還會(huì )使食品褪色、變色和破壞維生素等,從而降低食品的感官質(zhì)量和營(yíng)養價(jià)值,甚至產(chǎn)生有害物質(zhì),引起食物中毒。

    由于合成抗氧化劑化學(xué)性質(zhì)穩定,價(jià)格比較優(yōu)惠且有較好的效果,在預防脂質(zhì)氧化的方法中,往往被優(yōu)先考慮,一般使用的合成抗氧化劑有BHA、BHT、TBHQ等。

    然而由于這些抗氧化劑不是食品成分之一,而且在食品工業(yè)中存在很多違規操作,抗氧化劑的添加往往超出規定的標準,越來(lái)越多的研究表明:人工合成的抗氧化劑有一定的毒副作用,有害人們的身心健康,因此對食品中合成抗氧化劑的測定顯得尤為重要。

    本實(shí)驗建立了高效液相色譜法檢測花生油中8種抗氧化劑的方法。

    實(shí)驗部分

    儀器、試劑與材料

    主要儀器設備

    高效液相色譜儀(紫外檢測器);博納艾杰爾12位負壓SPE裝置。

    試劑材料

    乙腈、甲醇為色譜純;實(shí)驗用水為超純水,8種抗氧化劑標準品及化學(xué)式,CAS號見(jiàn)表1;

    表1.食品中8種抗氧化劑中文與英文名稱(chēng)、CAS號

    序號

    中文名稱(chēng)

    英文名稱(chēng)

    英文簡(jiǎn)稱(chēng)

    CAS號

    1

    沒(méi)食子酸丙酯

    Propyl   gallate

    PG

    121-79-9

    2

    叔丁基對苯二酚

    Tert-butylhydroquinone

    TBHQ

    1948-33-0

    3

    去甲二氫愈創(chuàng )木酸

    Nordihydroguaiaretic   acid

    NDGA

    500-38-9

    4

    叔丁基對羥基茴香醚

    Butylhydroxyanisole

    BHA

    25013-16-5

    5

    2,6-二叔丁基-4-羥甲基苯酚

    2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol

    Ionox-100

    489-01-0

    6

    沒(méi)食子酸辛酯

    Octyl   gallate

    OG

    1034-01-1

    7

    2,6-二叔丁基對甲基苯酚

     Butylated   hydroxytoluene

    BHT

    128-37-0

    8

    沒(méi)食子酸十二酯

    Dodecyl   gallate

    DG

    1166-52-5

    一次性無(wú)菌注射器;Nylon針式過(guò)濾器 (0.22 μm,直徑13 mm) ;

    Cleanert S C18-N固相萃取柱:2000 mg/12 mL

    樣品制備

    樣品提取

    稱(chēng)1 g樣品至50 mL離心管中,加10 mL乙腈,震蕩2 min,超聲10 min,3000 r/min離心5 min,收集上清液至雞心瓶中,再加10 mL乙腈萃取,震蕩2 min,超聲1 min,3000 r/min離心5 min合并上清液。

    樣品凈化

    先將小柱用5 mL甲醇,5 mL乙腈活化平衡,然后將待凈化液上SPE柱,收集流出液,再用10 mL乙腈︰甲醇=2︰1(V/V)進(jìn)行洗脫,并收集洗脫液,40℃蒸干,用1 mL乙腈溶解殘留物,過(guò)0.22 μm Nylon針式過(guò)濾器后待測。

    以上凈化步驟可用卓睿全自動(dòng)固相萃取儀完成。

    實(shí)驗條件

    液相條件

    色譜柱:Venusil® XBP C18(L),5 μm,150 ?,4.6 × 250 mm

    流動(dòng)相:A: 0.5%甲酸水溶液;B:甲醇;

    流  速:1 mL/min

    柱  溫:35℃

    進(jìn)樣量:5 μL

    檢測波長(cháng):280 nm

    流動(dòng)相梯度見(jiàn)表2

    表2.流動(dòng)相梯度

    時(shí)間/min

    A/%

    B/%

    0

    40

    60

    15

    30

    70

    25

    0

    100

    30

    0

    100

    31

    40

    60

    35

    40

    60

    結果與討論

    實(shí)驗結果

    由表3可知,采用固相萃取結合液相色譜法檢測食品中8種抗氧化劑,花生油基質(zhì)加標回收率89% ~ 106%,變異系數小于6.0%,能夠滿(mǎn)足檢測標準要求。

    表3. 花生油中8種抗氧化劑加標回收實(shí)驗結果

    物質(zhì)名稱(chēng)

    保留時(shí)間/min

    添加水平/mg/kg

    回收率

    /%

    CV

    /%

    PG

    4.430

    171

    93.8

    4.3

    TBHQ

    6.058

    135

    100.6

    2.5

    NDGA

    11.447

    121

    95.5

    5.8

    BHA

    13.078

    213

    105.0

    3.0

    Ionox-100

    17.806

    141

    105.2

    2.8

    OG

    20.920

    95

    93.5

    4.2

    BHT

    26.506

    151

    101.3

    2.7

    DG

    26.804

    135

    89.5

    4.3

    (GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法

    圖1. 8種抗氧化劑標準溶液液相色譜圖(標準濃度:PG: 171 μg/mL、TBHQ: 135 μg/mL、NDGA: 121 μg/mL、BHA: 213 μg/mL、Ionox-100: 141 μg/mL、OG: 95 μg/mL、BHT: 151 μg/mL、DG: 135 μg/mL)

    (GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法

    圖2. 花生油基質(zhì)空白液相色譜圖

    圖3. 花生油基質(zhì)加標液相色譜圖(加標濃度:PG: 171 mg/kg、TBHQ: 135 mg/kg、NDGA: 121 mg/kg、BHA: 213 mg/kg、Ionox-100: 141 mg/kg、OG: 95 mg/kg、BHT: 151 mg/kg、DG: 135 mg/kg)

    圖4. 乙腈提取后氮氣吹干油樣殘留(左:1 g油樣;右:凈化后油樣殘留)

    結論

    本實(shí)驗建立了花生油中8種抗氧化劑的檢測方法,并結合高效液相色譜對花生油中8種抗氧化劑含量進(jìn)行測定。對加標量為PG: 171 mg/kg、TBHQ: 135 mg/kg、NDGA: 121 mg/kg、BHA: 213 mg/kg、Ionox-100: 141 mg/kg、OG: 95 mg/kg、BHT: 151 mg/kg、DG: 135 mg/kg 的花生油樣品,回收率在89% ~ 106%之間,變異系數小于6.0%,符合實(shí)驗要求。

    附:相關(guān)產(chǎn)品

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    規格描述

    包裝數量

    訂貨號

    Venusil® XBP C18(L)

    5 μm,150 ?,4.6 × 250 mm

    1支

    VX952505-L

    Cleanert S C18-N

    2000 mg/12 mL

    20支/包

    S18200012N

    Qdaura®卓睿全自動(dòng)固相萃取系統

    4通道

    1臺

    SPE-40

    15位氮吹儀

    15位

    1臺

    NV15-M

    保護柱套

    適用于4.6 × 10 mm和2.1 × 10 mm

    1支

    SH-100

    直聯(lián)式保護柱芯

    5 μm,150 ?;4.6 × 10   mm

    4支/包

    VX950105-LS

    1.5 mL樣品瓶

    短螺紋透明帶書(shū)寫(xiě)處32 × 11.6 mm

    100/pk

    1109-0519

    1.5 mL樣品瓶蓋

    9   mm中心孔藍蓋,紅色橡膠/米色PTFE隔墊45°Shore   A; 1.0 mm

    100/pk

    0915-1819

    Nylon針式過(guò)濾器

    單膜,13 mm,0.22 μm

    200/pk

    AS021320

    一次性注射器

    2 mL無(wú)針頭

    100支/包

    LZSQ-2ML

    應用編號:AF10133

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